平成18年度家畜由来細菌の抗菌性物質感受性実態調査結果

　

　

1．はじめに

　薬剤耐性菌の発現状況調査（家畜由来細菌の抗菌性物質感受性調査）は、主要な抗菌性物質に対する耐性菌の発現状況等の動向を把握し、家畜に使用する抗菌性物質の人の健康と獣医療に対するリスク分析の基礎資料を得ることを目的としたものである。平成18年度の本調査は、食の安全・安心確保交付金実施要領（平成17年4月1日付け16消安第10272号消費・安全局長通知）に基づき実施された。

　公衆衛生分野への影響に配慮した全国的な薬剤耐性菌発現状況調査は、4菌種すなわち、食品媒介性病原細菌としてサルモネラとカンピロバクターを、薬剤感受性の指標細菌として腸球菌と大腸菌を対象に平成12年度から本格的に開始された。本調査においては、各都道府県が毎年1菌種を調査し、調査対象となる菌種は地域に偏りがないようにローテーションが組まれ、4年間で1調査クールが終了することになる。従って、平成12～15年度に第1クールが終了し、平成18年度は第2クールの3年目の調査となる。

　今般、平成18年度に実施されたこれらの調査について、各都道府県より提出された報告を取りまとめたので、その概要を紹介する。

　なお、これまでの各年度調査結果は、動物医薬品検査所ホームページ（http://www.nval.go.jp)に掲載されている。

　

2．材料及び方法

（1）調査検体数

　第1クールと同様に検体は健康家畜の糞便とし、検体数は都道府県ごとに各菌種とも4畜種（肥育牛、肥育豚、採卵鶏及びブロイラー）×6畜産経営体以上×1検体＝24検体以上を原則とし、1検体から都道府県ごとに指定された菌種を2株まで分離することとした。

（2）試験方法

　本調査は、対象菌種ごとに統一化、平準化された分離培養法、菌種同定法及び薬剤感受性試験法により実施した。同定は、形態学的及び生化学的性状検査により行った。

　分離菌株の供試薬剤に対する感受性の測定は、米国臨床検査標準協会（Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI（旧NCCLS））の提唱する寒天平板希釈法に準拠した方法により実施し、最小発育阻止濃度（MIC）を求めた。なお、耐性限界値（ブレークポイント）は、CLSIが定めたものについてはその値とし、CLSIで規定されていない薬剤については、原則として平成13年度の値（二峰性を示すMIC分布の中間点）とした。

　　　　　　　　　

3．調査成績

（1）サルモネラ

　サルモネラは、供試された283検体中36検体（12.7％）から64株（肥育牛由来0株、肥育豚由来9株、採卵鶏由来8株及びブロイラー由来47株）が分離された。分離菌株の血清型は、7種類認められ、そのうちSalmonella Infantisが32株（全てブロイラー由来）で、約半数を占めていた。

　分離された64株の薬剤感受性試験成績を表1（エクセル：27KB）に示した。供試した15薬剤のうち9薬剤（ABPC、CEZ、CTF、DSM、KM、OTC、BCM、NA及びTMP）に耐性が認められ、その耐性率は3.1～82.8％であった。同一個体から分離されたS. Infantis(2株)が、セフェム系薬剤（CEZ及びCTF）に対して耐性を示した。フルオロキノロン剤（ERFX）に対しては全て感受性を示した。

（2）カンピロバクター

　カンピロバクターは、供試された304検体中51検体（16.8％）から83株（肥育牛由来4株、肥育豚由来28株、採卵鶏由来24株及びブロイラー由来27株）が分離された。菌種の内訳は、Campylobacter jejuni 40株及びC. coli 43株であった。肥育牛、採卵鶏及びブロイラーからは主にC. jejuniが、肥育豚からはC. coliが分離された。

　分離された83株の薬剤感受性について、表2（エクセル：26KB）に示した。供試した9薬剤のうち7薬剤（ABPC、DSM、EM、OTC、CP、NA及びERFX）に対する耐性株が認められ、それらの耐性率は7.2～60.2%であった。菌種別の耐性率は、EMではC. jejuni 0%及びC. coli 34.9%であった。ERFXではC. jejuni 42.5%及びC. coli 30.2%であった。C. jejuniにおいてERFXに対する耐性率が昨年に比べて上昇しているが、調査株数が例年より少ないことが影響している可能性が考えられた。

（3）腸球菌

　腸球菌は、一般腸球菌（Enterococcus spp.）の選択培地による分離では、供試された272検体中235検体（86.4%）から421株（肥育牛由来108株、肥育豚由来103株、採卵鶏由来119株及びブロイラー由来91株）が分離された。一方、バンコマイシン（VCM）添加培地を用いた選択分離においては、336検体中1検体（0.3％）から2株が分離された。

　分離された一般腸球菌421株の薬剤感受性試験成績を表3（エクセル：28KB）に示した。調査薬剤のうち10薬剤（DSM、GM、KM、OTC、EM、LCM、ERFX、CP、AVM及びVCM）に対して耐性株が存在し、その耐性率は一般腸球菌で1.4～54.6％であった。このうち89株（肥育牛由来23株、肥育豚由来21株、採卵鶏由来19株及びブロイラー由来26株）がE. faecium として分離されたが、VGMに対する低感受性株は存在しなかった。また、一般腸球菌の選択培地で分離された菌のうち、採卵鶏から分離された4株がVCMに対するMIC値が≧32μg/mlであり耐性を示した。この4株について、菌種及びVCM耐性遺伝子を確認したところ、2株がE. faecalisで他の2株がE. gallinarumであり、いずれも高度耐性を示す遺伝子（vanA及びvanB）を保有しておらず、自然耐性菌であった。

　一方、VCM添加選択培地でブロイラーから分離された2株が、VCMに対するMIC値は≧64μg/mlであり耐性を示した。これらのVCM耐性遺伝子及び菌種同定を実施した結果、いずれもVCM耐性遺伝子（vanA）を保有するE. duransであり、VCM高度耐性のVREであった。

（4）大腸菌

　大腸菌は、供試された291検体中273検体（93.8％）から、500株（肥育牛由来149株、肥育豚由来126株、採卵鶏由来120株及びブロイラー由来105株）が分離された。

　これらの大腸菌500株の薬剤感受性試験成績を表4（エクセル：28KB）に示した。供試した15薬剤のうち13薬剤（ABPC、CEZ、CTF、DSM、GM、KM、OTC、BCM、CP、CL、NA、ERFX 及びTMP）に対する耐性株が存在し、それらの耐性率は0.2～46.6％であった。

　

4．おわりに

　平成11年度の予備調査及びそれ以降に全国の都道府県の協力により本格的に開始された全国調査第1クール（平成12～15年度）で集積された各種細菌の薬剤感受性試験成績等は、畜産分野における年次別及び由来動物別の耐性菌動向として取りまとめを行い、「動物医薬品検査所年報（第41号,63-67,2004）」に公表した。現在、畜産での抗菌性物質の使用状況と分離菌の薬剤感受性の動向について情報を蓄積しながら、詳細な解析を行っている。

　また、畜産分野で使用されている抗菌性物質は、内閣府食品安全委員会により作成された「家畜等への抗菌性物質の使用により選択される薬剤耐性菌の食品健康影響に関する評価指針」（平成16年9月）に基づき、リスク評価が行われている。今後、リスク評価の答申をふまえて、現状のリスク管理の見直しを含めた検討が行われていくこととなる。その中で、国内を網羅した本調査成績は、リスク評価に資する極めて重要なものとなっている。

　抗菌性物質は、家畜の感染症の治療（動物用抗菌剤）や成長促進（抗菌性飼料添加物）を目的に使用されているが、承認又は指定・流通・使用の各段階での様々な規制は、薬剤耐性菌の出現の抑制につながっている。抗菌性物質を使用する場合、動物用医薬品については、抗菌性物質の選択は添付文書等の有用な基本情報（抗菌スペクトル、薬物動態等）や原因菌の薬剤感受性データに基づき適正に選択すること、適応症に対応する用法・用量及び使用上の注意事項等を厳守すること、並びに抗菌性飼料添加物については、定められた使用の方法の基準を遵守することが重要である。

　今回取りまとめた調査成績については、畜産現場における抗菌性物質の適正な使用の一助として活用していただきたい。

　

農林水産省　動物医薬品検査所

独立行政法人　農林水産消費安全技術センター肥飼料安全検査部