肉用牛の消化管内・肝臓・胆汁のシガ毒素産生性大腸菌分布状況調査

10 当調査と併せて、胆汁及び消化管内容物に腸管出血性大腸菌O157又は大腸菌を添加したものを肝臓に塗布し、次亜塩素酸ナトリウム液による肝臓表面の菌に対する洗浄効果試験を実施しました。以下の資料で結果を公表しています。

薬事・食品衛生審議会 食品衛生分科会 乳肉水産食品部会（平成24年2月24日） 資料4（PDF:300KB）（外部リンク）

薬事・食品衛生審議会 食品衛生分科会 乳肉水産食品部会（平成24年3月30日） 資料2（PDF:264KB）（外部リンク）

と畜時の肉用牛の消化管内・肝臓・胆汁のシガ毒素産生性大腸菌O157の分布を把握する。

平成23年9月～12月に、と畜場1か所（A¹¹）で、解体処理された肉用牛96頭から、第一胃内容物、第四胃内容物、十二指腸内容物、直腸内容物を採取しました。そのうち、29頭の牛からは肝臓と胆のう内の胆汁も採取しました。

また、平成23年8月～12月に、別のと畜場2か所（B及びC）で、解体処理された肉用牛32頭ずつ（計64頭）から、肝臓を採取しました。

11 と畜場名A～Cは、他調査の結果で用いられていると畜場名と関連ありません。

第一胃内容物、第四胃内容物、十二指腸内容物、直腸内容物、肝臓（表層：36 cm² x 深さ1 cm）、胆汁を試料として、大腸菌O157の定性試験（3.4.1.1 (2) 、3.4.1.3）を行いました。分離された大腸菌O157について、シガ毒素産生性大腸菌かどうかを判定するため、PCR法（3.4.3.3 (2) ）により、シガ毒素遺伝子（stx）の有無の確認及び亜型の分類を行うとともに、病原性に関わる遺伝子であるインチミン¹²遺伝子（eae）やエンテロヘモリシン¹³遺伝子（hlyA）の有無を確認しました。また、シガ毒素蛋白の産生の有無を逆受身ラテックス反応法（3.4.3.4）により確認しました。

これらの試料（第一胃内容物、第四胃内容物、十二指腸内容物、直腸内容物、肝臓、胆汁）のうち1点でもシガ毒素産生性大腸菌O157が分離された肉用牛は、陽性（シガ毒素産生性大腸菌O157保有）と判定しました。

また、定性試験でシガ毒素産生性大腸菌O157陽性であった試料については、シガ毒素産生性大腸菌O157の定量試験（3.4.2.1）を行いました。

12 人の腸管粘膜への定着に関わる因子

13 溶血（赤血球の破壊）に関わる因子

と畜場Aにおいて、シガ毒素産生性大腸菌O157は、肉用牛96頭のうち20頭（21％）から分離されました。消化管の部位別にみると、直腸内容物から分離された頭数が最も多く（14頭）、次いで、十二指腸内容物（7頭）、第一胃内容物（4頭）、第四胃内容物（1頭）の順でした。シガ毒素産生性大腸菌O157の陽性牛20頭のうち6頭（30％）では、直腸内容物からシガ毒素産生性大腸菌O157は分離されませんでした（表18）。

表18：消化管内容物からのシガ毒素産生性大腸菌O157の分離状況

調査対象の消化管4部位の全てからシガ毒素産生性大腸菌O157が分離された1頭の、十二指腸内容物から分離された菌株の性状は、直腸・第一胃・第四胃の内容物から分離された菌株の性状（シガ毒素遺伝子の亜型、シガ毒素蛋白の産生性）と異なっていました。

と畜場Aにおいて肝臓と胆のう内の胆汁も採取した29頭のうち、1頭の胆汁からシガ毒素産生性大腸菌O157が分離され、この牛の十二指腸内容物と直腸内容物からも同じ性状（シガ毒素遺伝子stx_1a及びstx_2a保有、インチミン遺伝子（eae）及びエンテロヘモリシン遺伝子（hlyA）保有、シガ毒素1型・2型蛋白産生）の菌株が分離されました。肝臓からは、シガ毒素産生性大腸菌O157は分離されませんでした。

シガ毒素産生性大腸菌O157陽性の消化管内容物と胆汁における菌濃度を調べた結果、消化管内容物では、定量限界値（30 MPN/100 g）未満から最大値4.3 x 10⁸ MPN/100 gであり、胆汁では74 MPN/100 gでした。

と畜場B及びCで採取された肝臓64点からは、シガ毒素産生性大腸菌O157は分離されませんでした。

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